Mestrado em Ciências Farmacêuticas

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Acesso aberto (Open Access)
Avaliação do potencial anti-inflamatório das folhas de Passiflora edulis Sims e de seus efeitos sobre o metabolismo oxidativo de neutrófilos peritoneais de ratos
(Universidade Federal de Alfenas, 2015-02-26) Araújo, Cleiber Lucan Alves; Paula, Fernanda Borges De Araújo; Rodrigues, Maria Rita; Fernandes, Maurette Dos Reis Vieira
Os neutrófilos são as primeiras células recrutadas em um processo inflamatório, desempenhando um papel importante na defesa do hospedeiro pela ativação do sistema NADPH oxidase e através da ação da enzima mieloperoxidase (MPO). As espécies oxidantes (EO) produzidas durante a ativação dos neutrófilos são altamente reativas e tóxicas para o patógeno, mas podem comprometer a homeostase celular do hospedeiro. A espécie Passiflora edulis Sims (Passifloraceae) é rica em compostos fenólicos, conhecidos por suas atividades antioxidantes. A maior parte dos estudos farmacológicos dessa espécie vegetal é direcionada a suas ações sobre o sistema nervoso central e poucos estudos têm sido realizados na tentativa de avaliar o efeito anti-inflamatório desse gênero. Dessa forma, no presente trabalho, foi avaliada a atividade anti-inflamatória do extrato seco obtido das folhas de P. edulis Sims, assim como sua atividade sobre o metabolismo oxidativo de neutrófilos peritoneais de ratos em um modelo de inflamação aguda induzida pela administração intraperitoneal de carragenina. A análise por espectro de massas sugeriu a presença de isoorientina e isovitexina, principais constituintes relatados na espécie P. edulis. A administração do extrato diminuiu o número de neutrófilos recrutados para o foco inflamatório, entretanto, não alterou a atividade do sistema NADPH oxidase dessas células. Por outro lado, o extrato interferiu na formação de EO geradas a partir da ativação desse complexo, como, por exemplo, o ácido hipocloroso, sugerindo uma diminuição na atividade de MPO. Além disso, o extrato diminuiu a atividade de catalase, aumentou a atividade de glutationa peroxidase e não interferiu na atividade de superóxido dismutase. Dessa forma, nossos resultados sugerem que o potencial anti-inflamatório do extrato seco das folhas de P. edulis Sims poderia estar relacionado não somente à inibição do recrutamento de neutrófilos como também à modulação do metabolismo oxidativo de neutrófilos no foco inflamatório.
Acesso aberto (Open Access)
Avaliação dos efeitos do óleo obtido das amêndoas de baru (Dipteryx alata Vog.) sobre marcadores de risco cardiovascular e funções hepática e renal em ratos normais e dislipidêmicos
(Universidade Federal de Alfenas, 2016-07-29) Reis, Mayara Áthina; Paula, Fernanda Borges De Araújo; Souza, Éllen Cristina De; Ceron, Carla Speroni
A lipotoxicidade está altamente relacionada ao desenvolvimento de alterações metabólicas, que constituem os principais fatores de risco para o desenvolvimento de doenças crônicas não transmissíveis e suas complicações, tais como as doenças cardiovasculares (DCV) e doença hepática gordurosa não alcoólica (DHGNA). Estudos apontam que o consumo de alimentos funcionais e nutracêuticos podem contribuir para a redução ou prevenção de alterações ocasionadas por estas doenças. No cerrado brasileiro, está presente uma árvore conhecida popularmente como barueiro (Dipteryx alata Vog.), cujos frutos e sementes fazem parte da culinária local. O óleo obtido desta semente tem sido popularmente utilizado tanto na culinária como na medicina popular e preventiva. Embora exista alguns relatos de estudos envolvendo respostas metabólicas frente a ingestão de amêndoas de baru em modelos animal e humano, há carência de informações científicas a respeito dos efeitos biológicos do óleo extraído dessas amêndoas. Portanto, o objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da ingestão do óleo extraído da semente do baru sobre marcadores de risco cardiovascular, morfologia de órgãos bem como as funções renal e hepática de ratos normais e dislipidêmicos. As sementes foram obtidas de frutos de baru coletados ao acaso, em Januária, Minas Gerais, Brasil, durante o mês de agosto de 2014. O óleo foi obtido por prensagem mecânica, utilizando-se 12 toneladas de força em prensa hidráulica. A análise do óleo por cromatografia gasosa (CG-MS) forneceu o perfil de ácidos graxos (AG) semelhante ao relatado por outros estudos, demonstrando a presença significativa de AG insaturados, sendo o AG monoinsaturado oleico o de maior quantidade, e em menor concentração AG saturados, sendo os ácidos palmítico e lignocérico em maior quantidade. Ratos machos Wistar (400 ± 25g) foram divididos em quatro grupos: controle (1), óleo de baru (2), dislipidêmico (3) e dislipidêmico+óleo de baru (4). Os grupos 1 e 2 receberam água (10 mL/Kg) e óleo de baru (1 g/Kg), respectivamente; os grupos 3 e 4 foram tratados com emulsão rica em colesterol (10 mL/Kg), o último recebeu também óleo de baru (1 g/Kg), durante 15 semanas. Os animais foram pesados semanalmente e o consumo de água e ração foi quantificado durante todo o tratamento. Ao término do tratamento, os animais foram anestesiados e as amostras foram coletadas para determinação dos parâmetros: bioquímicos, peroxidação lipídica (PL) e morfologia hepática. Os resultados obtidos demonstraram que a administração da emulsão rica em lipídios foi capaz de induzir alterações metabólicas nos grupos 3 e 4, como dislipidemia e esteatose, bem como aumentou os valores de malonaldeído (MDA) na aorta dos animais do grupo 3, no ensaio de PL. O tratamento com o óleo de baru apresentou efeitos benéficos, como a diminuição dos valores de MDA na aorta dos animais dos grupos 2 e 4, proteção dos fígados dos animais do grupo 4, bem como não foi capaz de alterar a função renal dos animais. Os resultados obtidos são relevantes, demonstrando a segurança da utilização racional do óleo, uma vez que este é utilizado na medicina popular e preventiva assim como na culinária nacional.
Acesso aberto (Open Access)
Caracterização de compostos bioativos e avaliação dos efeitos do extrato hidroetanólico do cafeeiro (Coffea Arabica) sobre o perfil lipídico, estresse oxidativo e agregação plaquetária em ratos dislipidêmicos
(Universidade Federal de Alfenas, 2014-08-29) Simões, Mário Henrique Souza; Paula, Fernanda Borges De Araújo; Silvério, Alessandra Dos Santos Danziger; Rodrigues, Maria Rita
A aterosclerose tem ocupado um lugar de destaque entre os fatores de risco para o desenvolvimento de doenças cardiovasculares, que por sua vez, constituem uma das principais causas de morte no mundo. As dislipedimas, o estresse oxidativo e a ativação plaquetária são importantes fatores de risco para aterosclerose. Sendo assim, o uso de hipolipemiantes em associação com antioxidantes, anticoagulantes, antiagregantes plaquetários, anti-inflamatórios ou vasodilatadores, têm sido sugerido no controle e até mesmo na prevenção do processo aterosclerótico. Assim como a bebida de café, as folhas do cafeeiro apresenta uma composição química diversificada, contendo diferentes substâncias químicas, alguns associados com a saúde humana, como o ácido clorogênico. O presente trabalho tem como objetivo geral avaliar o potencial antioxidante do extrato seco de folhas de Coffea arabica bem como seus possíveis efeitos sobre o perfil lipídico, função hepática, função renal e a agregação plaquetária em ratos dislipidêmicos. As folhas coletadas foram submetidas à secagem em estufa, pulverizadas em moinho de facas e o extrato foi obtidos através do método de extração exaustivo de percolação simples em solução hidroalcoólica 70% (V/V), seguida de evaporação sob pressão reduzida e liofilização. A triagem fitoquímica foi realizada através da determinação da concentração de fenóis método de Folin & Ciocaulteau e da análise do extrato por espectrometria de massas, com ionização por electrospray, no modo negativo e positivo. O potencial antioxidante in vitro foi avaliado através da determinação da capacidade sequestrante de radicais DPPH. Ratos “Wistars” machos (300 ± 25g), foram divididos em quatro grupos: controle, extrato, dislipidêmico e dislipidêmico-extrato, sendo que os dois últimos receberam Triton WR-1339, via i.p. para indução da dislipidemia. Os níveis séricos de uréia, colesterol total, triglicerídeos e colesterol HDL foram determinados por métodos enzimáticos e a concentração de creatinina foi determinada pelo método do pricrato alcalino. A atividade de AST e ALT foi determinado pelo método de Reitman e Frankel e a atividade de fosfatase alcalina pelo método de Roy modificado. A peroxidação lipídica foi determinada no plasma e em homogeneizados de aorta por meio da determinação da concentração de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) por fluorimetria. A agregação plaquetária foi avaliada em plasma rico em plaquetas por turbidimetria. A concentração de fenóis totais foi igual a 6,817 ± 0,133 g EAG/100 g de extrato. O conjunto de dados fornecidos pelo espectro de massas sugeriu que o extrato em estudo possui em sua composição compostos fenólicos como o ácido quínico, a rutina e o ácido clorogênico. O extrato apresentou atividade sequestrante de radicais DPPH máxima de 90,1%, na concentração de 0,16 mg/ml, comparável aos padrões BHT (95,5%) e ácido gálico (88,2%). Nenhuma alteração significativa foi observada nos níveis de uréia e creatinina bem como nas atividades de AST, ALT e fosfatase alcalina. Os animais tratados com Triton WR 1339 apresentaram um aumento nos níveis séricos de colesterol (CT) e de triglicerídeos, na concentração de TBARS no plasma e na aorta bem como na agregação plaquetária. O grupo de animais tratados com o extrato não foi capaz de induzir alterações no perfil lipídico, mas apresentou uma redução significativa na concentração de TBARS e na agregação plaquetária em comparação com os animais dislipidêmicos não tratados com o extrato. Estes resultados sugerem que o extrato em estudo pode apresentar um efeito benéfico sobre a prevenção da aterosclerose, por prevenir o aumento da peroxidação lipídica no plasma e na aorta bem como a agregação plaquetária em ratos dislipidêmicos.
Atherosclerosis has occupied a prominent place among the risk factors for developing cardiovascular disease, which in turn, constitute a major cause of death worldwide. Dyslipidemias, oxidative stress and platelet activation are important risk factors for atherosclerosis. Thus, the use of statins in combination with antioxidants, anticoagulants, antiplatelet, antiinflammatory or vasodilators has been suggested to control and even prevent atherosclerotic processes. As the coffee beverage, its leaves has a diversified chemical composition, containing different chemicals, some associated with human health, such as chlorogenic acid. This work has as main objective to evaluate the antioxidant potential of dried extract of leaves of Coffea arabica and its possible effects on the lipid profile, liver function, renal function and platelet aggregation in dyslipidemic mice. The collected leaves were dried in an oven, pulverized in a Wiley mill and the extract was obtained by the method of exhaustive extraction of simple percolation in water-alcohol solution 70% (V / V), followed by evaporation under reduced pressure and lyophilization. Phytochemical screening was done by determining the concentration of phenols Folin & Ciocaulteau and analysis of the extract by mass spectrometry with electrospray ionization in negative and positive ways. The antioxidant potential in vitro was assessed by determining the ability of scavenging DPPH radicals. Rats "Wistar" rats (300 ± 25g) were divided into four groups: control, extract, extract-dyslipidemic and dyslipidemic, with the latter two received Triton WR-1339, ip To induce dyslipidemia. Serum urea, total cholesterol, triglycerides and HDL cholesterol were determined by enzymatic methods and creatinine concentration was determined by the alkaline pricrate method. The activity of AST and ALT were determined by the method of Reitman and Frankel and alkaline phosphatase activity by the method of Roy with modifications. Lipid peroxidation was determined in plasma and aortic homogenates by determining the concentration of thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) by fluorimetry substances. Platelet aggregation was evaluated in platelet-rich plasma by turbidimetry. The concentration of total phenols was equal to 6.817 ± 0.133 g EAG/100 g of extract. The data set provided by the mass spectrum suggested that the extract under study has in its phenolic composition as quinic acid, rutin and chlorogenic acid. The extract showed maximum scavenging activity of DPPH radicals of 90.1% at a concentration of 0.16 mg / ml, comparable to BHT standards (95.5%) and gallic acid (88.2%). No significant change was observed in the levels of urea and creatinine as well as in AST, ALT and alkaline phosphatase activities. The animals treated with Triton WR 1339 showed an increase in serum levels of cholesterol (TC) and triglycerides in TBARS concentration in plasma and aorta as well as platelet aggregation. The group of animals treated with the extract was not able to induce changes in the lipid profile, but showed a significant decrease in TBARS concentration and platelet aggregation compared with dyslipidemic animals not treated with the extract. These results suggested that the extract study has a beneficial effect on the prevention of atherosclerosis by preventing the increase in lipid peroxidation in plasma and aorta as well as platelet aggregation in dyslipidemcs rats.
Acesso aberto (Open Access)
Efeito do extrato etanólico de folhas de Passiflora edulis sobre a ativação de macrófagos e formação de produtos finais de glicação avançada (AGEs) em ratos diabéticos
(Universidade Federal de Alfenas, 2013-02-18) Martins, Carolina Fernandes Ribas; Paula, Fernanda Borges De Araújo; Vieira, Leda Quércia; Rodrigues, Maria Rita
RESUMO : O aumento na formação de produtos finais de glicação avançada (AGEs) têm sido apontado como via responsável pelo comprometimento da função imunológica levando ao aumento da suscetibilidade à infecções em indivíduos diabéticos. Estes mecanismos podem envolver ativação do sistema NADPH oxidase, redução da capacidade fagocítica, interação entre os AGE formados e macromoléculas importantes para a função imune ou com receptores específicos para AGE (RAGEs) com aumento na produção de citocinas inflamatórias. O uso terapêutico das folhas de diversas espécies do gênero Passiflora é comum na medicina popular em diversos países, inclusive no Brasil. Porém, as informações científicas a respeito do uso de extratos de folhas de Passiflora edulis no tratamento do diabetes e de suas complicações, ainda não estão totalmente esclarecidas. Sendo assim, este trabalho tem como objetivo avaliar os efeitos destes extratos sobre a capacidade fagocítica e a produção de espécies reativas de oxigênio em macrófagos de ratos diabéticos. Ratos machos Wistar (300 ± 25g) foram tratados com aloxano (120mg/kg de peso corporal dissolvido em salina 0,9%, via intraperitoneal). O extrato etanólico foi obtido por maceração em solução hidroalcólica 70%(V/V), seguida de evaporação sob pressão reduzida e liofilização. Este foi diluídos em água e administrado por gavagem (200mg do extrato etanólico seco/kg de peso do animal), durante 8 semanas após a indução do diabetes. Os animais foram anestesiados e o sangue colhido por punção cardíaca para obtenção de soro e determinação da glicemia por método enzimático colorimétrico e dos níveis de AGEs por fluorescência. Aconcentração de frutosaminas foi determinada no soro por método colorimétrico. A ativação celular foi avaliada através da produção de ERO bem como da capacidade fagocítica de macrófagos peritoniais ativados com C albicans (ATCC69548) opsonizada. A produção de ERO foi determinada por quimioluminescência amplificada com luminol. Os ensaios para avaliação da capacidade fagocítica e microbicida foram realizados através da incubação dos fagócitos frente à Candida albicans (ATCC 69548) em diferentes intervalos de tempo. Foram consideradas como tendo atividade fagocítica as células que apresentaram uma ou mais C. albicans internalizadas. A atividade microbicida foi determinada através da avaliação da viabilidade das leveduras fagocitadas
Acesso aberto (Open Access)
Teor de polifenóis e avaliação dos efeitos do extrato seco de folha de maracujá azedo (Passiflora edulis sims) sobre a glicação de colágeno e a ativação plaquetária em ratos diabéticos
(Universidade Federal de Alfenas, 2014-01-15) Salles, Bruno Cesar Correa; Paula, Fernanda Borges De Araújo; Silva, Geraldo Alves Da; Garcia, José Antônio Dias
A busca de plantas medicinais com potencial para o alívio de dores e até mesmo a cura de doenças tem se expandido em diversos países, inclusive no Brasil. O Brasil é um grande produtor de maracujá, que além do seu valor nutricional de seus frutos, tem sido utilizado também com finalidade terapêutica, na medicina popular. Além das diversas aplicações do chá das folhas de maracujá na medicina popular, alguns autores têm sugerido também as atividades hipoglicemiante, antioxidante, anti-glicante e antiagregante de plaquetas para extratos de folhas obtidos de diferentes espécies de maracujá. No entanto, o papel modulatório do extrato bruto seco de folhas P. edulis Sims sobre a glicação proteica e ativação plaquetária não está totalmente esclarecido. O diabetes mellitus é considerado como um importante problema de saúde pública, devido à sua elevada prevalência, ao desenvolvimento de complicações crônicas incapacitantes e ao alto custo econômico gerado pelo seu tratamento. Estudos desenvolvidos com diferentes modelos experimentais têm demonstrado que o DM leva à ativação de plaquetas com consequente aumento de sua agregação bem como ao aumento da glicação de proteínas, sendo estas alterações diretamente envolvidas nas vias bioquímicas que levam ao desenvolvimento das principais complicações crônicas induzidas pelo DM. Sendo assim, o presente trabalho teve como objetivo geral determinar o teor de polifenóis totais e avaliar os efeitos do extrato seco das folhas de Passiflora edulis Sims sobre marcadores bioquímicos, a glicação de colágeno, a ativação e a agregação plaquetária em ratos diabéticos. Ratos machos Wistar (300 ± 25g) foram tratados com aloxano (150mg/Kg de peso corporal dissolvido em salina 0,9%, via intraperitoneal). As folhas secas de Passiflora edulis Sims foram coletadas no município de Alfenas-MG (21° 27’ 33’’ S; 46° 01’ 59’’ w; Altitude 789 m) e identificadas na Universidade Federal de Lavras-MG. O extrato seco foi obtido por maceração em solução hidroetanólica 70%(V/V), seguida de evaporação sob pressão reduzida e de liofilização. O extrato seco foi diluído em água e administrado por gavagem durante 90 dias após a indução do diabetes (200mg do extrato seco/Kg de peso do animal). O grupo controle recebeu apenas água. A agregação plaquetária foi avaliada em agregômetro da marca PA-04 Qualiterm Eletronica à 37°C. Os marcadores bioquímicos (glicemia, ureia, colesterol total e frações ) foram dosados no soro por métodos enzimáticos e a creatinina foi determinada no soro dos animais pelo método de jaffé modificado ( rastreável ao IDMS). O conteúdo de colágeno glicado foi dosado por fluorescência. A produção de espécies oxidantes foi monitorada por quimiluminescência. A administração do extrato seco de folhas de Passiflora edulis Sims reduziu a glicemia em jejum bem como os níveis de HbA1C no sangue dos animais diabéticos. A administração do extrato seco das folhas de Passiflora edulis Sims impediu o aumento dos níveis de creatinina no soro dos animais diabéticos. O extrato seco das folhas de Passiflora edulis Sims foi capaz de reduzir a concentração de lipoproteínas aterogênicas no soro dos animais tratados. Os animais diabéticos apresentaram maior produção basal de oxidantes e a agregação plaquetária em relação aos animais não diabéticos. O tratamento dos animais diabéticos com o extrato de Passiflora edulis Sims atenuou os efeitos do diabetes sobre a produção de oxidantes e a agregação plaquetária. Os níveis de AGEs determinados em amostras de colágeno obtido do tendão de animais diabéticos foi maior que nos animais não diabéticos e o tratamento dos animais diabéticos com o extrato seco levou a uma redução da glicação do colágeno.

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