Efeito do uso de citocininas no potencial embriogênico e obtenção de protoplastos em calos de Jequitibá-rosa Cariniana legalis (Mart.) O. Kuntze

O Jequitibá-rosa é uma espécie lenhosa da Mata Atlântica de alto valor econômico e ecológico. Com poucos indivíduos na natureza, atualmente se encontra ameaçada de extinção segundo a IUCN. Dessa forma faz-se necessário o aprimoramento de técnicas de propagação vegetativa de tal espécie, sendo que a embriogênese somática e cultura de protoplastos são estratégias promissoras apontada para tal. A primeira parte do presente estudo buscou investigar o efeito de diferentes concentrações dos reguladores de crescimento da classe das citocininas BAP (6- benzilaminopurina) e KIN (Cinetina) no potencial embriogênico de calos de Jequitibá-rosa. Todos os tratamentos passaram por análise citoquímica com os corantes azul de Evans e carmim acético a fim de identificar a presença de células com atividade embriogênica. Dentro dos tratamentos testados, aqueles que apresentaram os melhores resultados para a presença de células embriogênicas foram T0 MC e ME: 0,0 mg L-1 BAP + 0,0 mg L-1 KIN, T3 (ME): 10,0 mg L-1 BAP + 0,0 mg L-1 KIN e T4 (B): 10,0 mg L-1 BAP + 3,0 mg L-1 KIN. Tais tratamentos foram então submetidos a análise histológica que demonstrou que não havia a presença de estruturas relacionadas à embriões somáticos em nenhum desses tratamentos. Em contrapartida, foi identificada a presença de substância que se assemelham a matriz extracelular, fazendo-se necessário maiores estudos dessa natureza com a espécie. A segunda parte desse estudo teve como objetivo a obtenção de protoplastos através de calos de Jequitibá-rosa. Os calos foram induzidos em meios de cultura WPM 3 mg/L-1 BAP (6-benzilaminopurina) e 0,1 mg/L-1 ANA (Ácido Naftaleno Acético). Para a degradação da parede celular, as células calosas foram submetidas a um tratamento com solução enzimática de celulase, pectinase em manitol junto com a solução W5. Foram realizados os testes de viabilidade celular por meio de contagem de células com azul de Evans 1%, com auxílio da câmara de Neubauer, e testada a influência da solução W5 na regeneração de protoplastos. Foi constatado que o uso da solução W5 não gerou diferença na obtenção de células.